人膀胱癌阿黴素耐藥株所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全台內操作,並請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌後方能丟棄。收到細胞後,在倒置鏡下觀察整個細胞生長情況。
人膀胱癌阿黴素耐藥株的傳代其操作步驟如下(斜麵接種法):
(1)從冰箱冷藏室中取出菌種斜麵後,應在室溫放置約30分鍾。
(2)將裝有新鮮配製的培養基菌種保藏管管壁上注明菌名及接種日期,和傳代菌種一並移入潔淨工作台,打開紫外燈照射一小時。
(3)關閉紫外燈。點燃酒精燈,左手握住人膀胱癌阿黴素耐藥株斜麵,將管口靠近火焰上方,右手拿接種棒後端,將接種環燒紅約30秒,隨後將接種棒金屬部分在火焰上燒灼,往返通過三次。
(4)右手用無名指、小指及掌部夾住管塞,左手將管口在火焰上旋轉燒灼,右手再輕輕拔開管塞,將接種環伸入管內先在近壁的瓊脂斜麵上靠一下,稍冷後再至菌苔上,刮取少量菌苔,隨即取出接種棒並將菌種管口移至火焰上方。
(5)塞上管塞,左手將人膀胱癌阿黴素耐藥株放下,取營養瓊脂斜麵一支,照上述操作打開管塞,將接種環伸入管內至瓊脂斜麵的底部向上劃一條直線,然後從底部向上作連續曲線劃線,一直劃到斜麵頂端,使細菌接種在斜麵的表麵上。
(6)取出接種環,在火焰上方將培養基管蓋上塞子,然後將接種過細菌的接種環在火焰上燒灼滅菌。
(7)將已接種好的細菌管置30~35℃細菌培養箱培養22~24h,真菌管置23~28℃真菌培養箱zui多培養7天。
當工作用人膀胱癌阿黴素耐藥株傳代代數小於5時,可直接用上一代工作用菌種轉接下一代工作用菌種,如:(W3)可直接轉接為(W4)。按上述程序操作,直至(W4)轉為(W5)為止,需重新接種,舊的工作菌種進行銷毀。